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酶聯(lián)免疫吸附測定ELISA操作中標(biāo)本的收集用于ELISA測定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前使用血清（漿）標(biāo)本測定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集時間甚或體位有可能會對測定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4：00—6：00之間，會有一峰值出現(xiàn)；生長激素、促黃體激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以陣發(fā)...

酶標(biāo)抗體的質(zhì)量鑒定與保存1．酶活性和抗體效價測定采用雙向免疫擴(kuò)散法（稀釋抗體）和DAB-H2O2顯色反應(yīng)檢測結(jié)合物中抗體效價和免疫沉淀線中的酶促反應(yīng)。2．酶量和IgG量酶量（mg/ml）=OD403′0.4IgG量（mg/ml）=（OD280-OD402′0.42）′0.94′0.62其中，0.42為酶蛋白本身（0.3）及結(jié)合戊二醛后增加的OD值，0.94為抗體蛋白與醛化酶結(jié)合后，OD280約增加6%，故乘以0.94。兔IgG的OD280=1.0時為0.62.過碘酸鈉標(biāo)記法I...

ELISA法檢測干擾素干擾素（IFN）是一類具有廣譜抗病毒活性的蛋白質(zhì)，僅在同種細(xì)胞上發(fā)揮作用。根據(jù)其來源、理化及生物學(xué)性質(zhì)的不同，可分為IFN-α、IFN-β、IFN-γ3種干擾素。其中，IFN-α主要由白細(xì)胞產(chǎn)生，IFN-β由成纖維細(xì)胞產(chǎn)生，IFN-γ主要由T細(xì)胞在免疫應(yīng)答中受到抗原或絲裂原活化后分泌產(chǎn)生。3種干擾素中，IFN-α、IFN-β抗病毒作用較強(qiáng)，IFN-丁免疫調(diào)節(jié)作用較強(qiáng)。目前已可用基因重組技術(shù)制備干擾素投入臨床使用。干擾素不能直接滅活病毒，其抗病毒作用是由于...

通過噬菌體ELISA鑒定得到的噬菌體克隆經(jīng)過3～4輪的篩選后，應(yīng)該能夠富集到能與受體特異性結(jié)合的噬菌體群體。通常而言，在后幾輪的篩選中，每次獲得的噬菌體總量都會增加，但是單就這個現(xiàn)象并不一定能說明已經(jīng)篩選到了受體特異性結(jié)合的肽段。能與靶分子非特異性結(jié)合或者能與篩選基質(zhì)的噬菌體克隆也會造成這一現(xiàn)象。噬菌體ELISA可以說是zui靈敏的鑒定所獲取的噬菌體克隆結(jié)合特異性的方法之一。受體被包被在各孔中，與之結(jié)合的噬菌體通過辣根過氧化物酶偶聯(lián)的抗M13噬菌體抗體檢測。只含有捕獲抗體或者...

BAS酶聯(lián)免疫吸附試驗材料和方法（以篩選抗空腸彎曲菌共同抗原的單克隆抗體為例）1材料（1）空腸彎曲菌共同抗原提取物，自制。BAS酶聯(lián)免疫吸附試驗材料和方法（2）生物素化羊抗鼠IgG（BSAMG），衛(wèi)生部上海生物制品所。（3）ABC試劑，衛(wèi)生部上海生物制品所。如ABC試劑需自己配制，可按說明要求，將親和素與酶標(biāo)生物素按一定比例混合，置37℃孵育30min后使用。（4）被檢雜交瘤培養(yǎng)物上清液。（5）其他試劑及器材同常規(guī)ELISA法。BAS酶聯(lián)免疫吸附試驗材料和方法2方法ABCEL...

臨床檢驗的檢測結(jié)果，每次或每天之間不可能*。決定允許的誤差范圍，以臨床上不造成誤診與漏診為準(zhǔn)，通過以下步驟來確定質(zhì)控范圍。ELISA質(zhì)量控制--室內(nèi)質(zhì)量控制程序一、*條件下的測定誤差*條件下已知值質(zhì)控血清變異（optimalconditionsvariance,簡稱OCV）的測定：在本實驗室*條件下（包括操作者、試劑、儀器等）檢測質(zhì)控血清20-30次，測得結(jié)果計算，求出該組數(shù)據(jù)的均值和標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示該實驗室的*工作質(zhì)量?，F(xiàn)舉例說明HBsAgELISA法檢測時OCV的測定。...